从一组多张图像中减去一个共同的背景

问：

我必须从一系列图像（图像数量 = 250，也是 16 位 tiff）中删除背景（16 位 tiff 图像），如实际图主示例图像所示（主图像的 jpg 已上传）。我编写了以下代码来执行相同的操作，但减法部分无法正常工作。生成的图像在角落（极亮像素）处的计数为 5000，如图所示，减去减去（上传生成图像的 jpg）。请让我知道此代码中的问题所在。

#read image series 
S01=[i for i in glob.glob("C:/Users/experiment 2/S01/*.tif")] #16 bit tiff main image
S02=[i for i in glob.glob("C:/Users/experiment 2/S02/*.tif")] #16 bit tiff background image

#average the background 
bg=np.array([np.array(Image.open(fname)) for fname in S02])
bg_avg=np.array(np.mean(bg,axis=(0)),dtype=np.uint16)
bg_out=Image.fromarray(bg_avg) #image to plot using imshow

#remove background image from each of the main image
main=np.array([np.array(Image.open(fname)) for fname in S01]) #(has maximum of 1200)
main_sub=np.subtract(main,bg_avg) # i am not sure if this line in the code is actually subtracting background from the series of main image
main_avg=np.array(np.mean(main_sub,axis=(0)),dtype=np.uint16) 
main_out=Image.fromarray(flame_avg) #(has maximum of 5000)

Plt.figure
subplot(1,2,1)
plt.imshow(main_out)
subplot(1,2,2)
plt.imshow(bg_out)

plt.show()